Factors that affect oocyte vitrification in small ruminants / Fatores que afetam a vitrificação de oócitos em pequenos ruminantes

At the end of its growth, the mammalian oocyte, include in preovulatory follicle, is the largest cell of the organism, with about 120 µmin diameter. The size of oocyte, together with the specific arrangement of its organels and cytoskeleton, makes a real challenge forcryopreservation techniques. For such large cell, methods that do not require equilibrium to cryopreservation, such as vitrification,are more promising. It is important to highlight that the cryopreservation of oocytes is more difficult than zygotes or later stageembryos and this technique is a challenging task because of oocyte sensitive nature to chilling and toxic effects of cryoprotectants.However, the development of a reliable method for oocyte cryopreservation would be an important advance in the field of reproductivebiology for the preservation of genetic resources. The vitrification of mammalian oocytes is influenced by many variables, such asdifferent cryoprotectants, vitrification techniques, presence or absence of cumulus cells, the oocyte structure, metabolism (such aslevel of lipid storage) and meiotic stage. Thus, all these factors should be considered to optimize the techniques and adapt them tooocytes from each species. Therefore, the present review aims to describe the main factors that affect oocyte vitrification in sheepand goats, reporting the main findings in both species, as well as perspectives of future improvements.

No fim do seu crescimento, o oócito mamífero é a maior célula do organismo, com cerca de 120 µm de diâmetro. O tamanhodo oócito em conjunto com a disposição específica das organelas e do citoesqueleto faz com que ele represente um verdadeirodesafio para as técnicas de criopreservação. Para grandes células, métodos que não exigem equilíbrio para criopreservação,como a vitrificação, são mais promissores. É importante ressaltar que a criopreservação de oócitos é mais difícil que de zigotosou embriões em estádios mais tardios e esta técnica representa um desafio devido à natureza sensível do oócito ao resfriamentoe aos efeitos tóxicos de crioprotetores. Entretanto, o desenvolvimento de uma técnica confiável para a criopreservação oocitáriarepresentaria um avanço importante para a preservação de recursos genéticos. A vitrificação de oócitos em mamíferos é influenciadapor muitas variáveis, tais como diferentes crioprotetores, técnicas de vitrificação, presença ou ausência de células do cumulus,estrutura do oócito, metabolismo (como o nível de armazenamento de lipídios) e estágio meiótico. Assim, todos esses fatoresdevem ser considerados quando o objetivo é otimizar as técnicas e adaptá-las para oócitos de cada espécie. Assim, a presenterevisão tem como objetivo descrever os principais fatores que afetam a vitrificação de oócitos em ovinos e caprinos, relatando osprincipais resultados em ambas as espécies, bem como as perspectivas de melhorias futuras.

Laparoscopic ovum pick up (LOPU) in goats: from hormonal treatment to oocyte possible destinations / Colheita de oócitos por laparoscopia em caprinos: do tratamento hormonal aos possíveis destinos dos oócitos

Whether we are collecting oocytes from donors as part of a program of in vitro embryo production (IVP) and/or to promote advances in emerging biotechnologies as cloning and transgenesis, the success rate depends on the development of methodological aspects of recovering oocytes. To succeed, sufficient number of good quality oocytes is the prerequisite for various reproductive techniques and laparoscopic ovum pick up (LOPU) is the recommended technique for obtaining them from live goats. However, the variability of the quantity and quality of the oocytes collected still limits the large-scale use of this technology. Under the current conditions, too large variability is reported with oocyte recovery rates ranging from 40 to 90%, and the number of harvested oocytes per female between 4 and 14, in different laboratories. This variability can depend on either intrinsic characteristic of the donors, suchas breed, age, individual response or on aspects that we might be able to control, such as stimulation treatment, type of needle, aspiration pressure, among others. We believe that new investigations should contribute to significant improvement of LOPU yield. This review aims to report different factors influencing goat donor response for LOPU, presenting main steps for oocytes recovery as well as technical alternatives for improving LOPU efficiency. Furthermore, it is aimed to discuss about the potential use of goatoocytes after their recovery by LOPU and present overall results in goat IVP worldwide.

Independentemente se a coleta de oócitos é parte de um programa de produção in vitro de embriões (PIVE) e/ou promoverá avanços biotecnológicos como clonagem e transgênese, os aspectos metodológicos nas técnicas de recuperação de oócitos são imprescindíveis. Para alcançar sucesso de forma ótima, número suficiente de oócitos de boa qualidade é pré-requisito para diversas técnicas reprodutivas e a colheita de oócitos por laparoscopia (COL) é a técnica recomendada para obtê-los de cabras saudáveis. Entretanto, a variabilidade na quantidade e qualidade de oócitos coletados ainda limita o uso desta tecnologia em grande escala. Sob as condições atuais, uma grande variação é relatada na literatura com taxas de recuperação de oócitos variando de 40 a 90% e o número de estruturas coletadas por fêmea entre 4 e 14 oócitos em diferentes laboratórios. Esta variabilidade pode ocorrer tanto em função de variáveis não controláveis, como raça, idade e características intrínsecas da cabra, como devido a aspectos controláveis, como o tratamento superestimulatório, tipo da agulha, pressão de aspiração, dentre outros. Acredita-se que novas pesquisas devam contribuir significativamente para a melhoria da técnica de COL. Esta revisão objetiva relatar os diferentes fatores que influenciam a resposta de cabras doadoras após COL, apresentando as principais etapas para recuperação oocitária assim como modificações técnicas propostas para melhoria da eficiência da COL. Além disso, discutir sobre potencias aplicações de oócitos caprinos depois de sua recuperação por COL e resultados gerais sobre a técnica no mundo.